Título do estudo: Estudo de toxicidade in vitro de ION-ZCM1 em células humanas usando um método de teste de citotoxicidade MTT

Autor: INDEVION Biotechnology Research and Development Ltd. Investigador Principal Dr. Zsolt Keresztessy, Ph.D. (2018).

Métodos: Os dados gerados a partir dos ensaios de citotoxicidade in vitro foram utilizados para prever a toxicidade em condições de cultura celular, com base na linhagem celular HACAT. Um Controle Positivo padrão (PC), nomeadamente Lauril Sulfato de Sódio a 10% (p/v) em PBS, foi utilizado no teste e uma série de diluições deste PC foi aplicada no teste juntamente com a série de diluições do Composto de Teste (ION- ZCM1).

Resultados: ION-ZCM1 apresenta toxicidade com IC50 de 0,0224%, que é de 119 uM de teor de cobre (e de 359 uM de teor de zinco). Esta toxicidade para as células dos queratinócitos é independente do efeito do pH do composto de teste (o efeito do pH no meio de ensaio não é relevante igual ou inferior a 0,39%, uma vez que o pH é> 6) e independente do efeito da osmolaridade (o efeito da osmolaridade é não é relevante abaixo de 3,125%, (ou seja, 165,625 mOsm/L de NaCl e ~200 mOsm/L do meio de cultura celular, o que equivale a 365,6 mOsm/L no total no meio de ensaio), conforme mostrado pela série de diluição de NaCl usada no teste como controle de osmolaridade).

Conclusões: As evidências mostram que a aplicação da substância teste em formulação tópica na concentração de 25% ION-ZCM1 não é tóxica para animais/humanos. Isto pode ser explicado pela presença da barreira protetora, a camada de queratina da pele. Além disso, o composto de teste em altas doses, que se difunde através da pele, é diluído no corpo/tecidos e corpo/fluidos. Foi estabelecido um perfil de segurança para uso tópico na concentração de 25% em células da pele humana.